ICS65.020 CCS B 05 DB62 甘肃 省地 方标准 DB62/T4671—2023 草木香豆素含量的测定 Determination of coumarin content in Melilotus spp. 地方标准信息服务平台 2023-03-28发布 2023-05-01实施 甘肃省市场监督管理局 发布 地方标准信息服务平台 DB62/T4671—2023 目 次 前言 II 范围 2. 规范性引用文件 3 术语和定义 4. 原理 4.1高效液相色谱法 4.2荧光光谱法 4.3紫外光谱法 4.4近红外光谱法 4.5 电化学分析法 5 试剂或材料 5. 1 无水甲醇 5.2 无水乙醇 5.3 标准品溶液（对照品） 5.4 标准品储备液 5.5 微孔滤膜 5.6 乙醇/水溶液 5.7 四丁基四氟硼酸铵 5.8 N,N-二甲基甲酰胺 5. 9 电解质溶液 仪器设备 6. 1 高效液相色谱仪 6. 2 分析天平 6,3 旋转蒸发仪 6.4 振荡器 6.5 超声波清洗器 6.6 荧光光谱仪 6.7 紫外分光光度计 6.8 近红外光谱仪 6.9 电化学工作站 试样制备与保存 8 分析步骤 8.1 提取 8.2 标准曲线的制定 9 测定 9.1 高效液相色谱法测定 9.2荧光光谱法测定 9.3 紫外光谱法测定 I DB62/T4671—2023 9.4近红外光谱法测定 9.5电化学分析测定 10实验数据处理 11允许差 附录A（资料性） 香豆素标准样品液相色谱图 ...7 附录B（资料性） 香豆素标准样品荧光光谱图 附录C（资料性） 不同样品香豆素近红外预测模型： ..9 附录D（资料性） 香豆素标准样品电化学差分脉冲伏安图 地方标准信息服务平台 II DB62/T4671—2023 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由甘肃省林业和草原局提出并监督实施。 本文件由甘肃省草业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：兰州大学草地农业科技学院、中国科学院兰州化学物理研究所、农业部牧草与草 坪草种子质量监督检验测试中心（兰州）、兰州市农业科技研究推广中心。 本文件主要起草人：张吉宇、董树清、王艺蒙、彭文静、闫启、王彦荣、邵士俊、王朋磊、张正社。 本文件由兰州大学草地农业科技学院负责解释。 地方标准信息服务平台 III 地方标准信息服务平台 DB62/T4671—2023 草木香豆素含量的测定 1范围 本文件规定了草木中香豆素含量的色谱、光谱、电化学等测定方法。 本文件适用于草木中香豆素含量的测定和定量分析。 规范性引用文件 2 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 14699.1 饲料采样 饲草产品抽样技术规程 RDS NY/T2129 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 香豆素coumarin 2H-1-苯并吡喃-2-酮，分子式为CoHeO2，相对分子质量146.13，熔点：68°℃73℃C(lit.)，呈白色结 晶固体，具有抗肿瘤、抗菌、抗凝血等作用，可提高植物的抗逆性， 4原理 4.1高效液相色谱法 利用反相色谱柱分离，以保留时间定性，外标法定量 4.2荧光光谱法 利用香豆素在激发波长为660nm，发射波长660nm～750nm的荧光强度进行荧光光谱分析测定。 4.3紫外光谱法 利用香豆素在300nm～600nm光谱区的分子吸收来进行紫外光谱分析测定。 4.4近红外光谱法 利用香豆素中的化学键的泛频振动或转动对近红外光的吸收特性，以漫反射或透射方式获得在近 红外区的吸收光谱或透射光谱。 4.5电化学分析法 1