ICS 65.020.01 CCS B 05 黑 DB 23 龙 江 省 地 方 标 准 DB23/T 3025—2021 唐棣组培快繁技术规程 2021- 12 - 16 发布 黑龙江省市场监督管理局 2022- 01 - 15 实施 发 布 DB23/T 3025—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由黑龙江省林业和草原局提出。 本文件起草单位：中国科学院东北地理与农业生态研究所农业技术中心、哈尔滨集智农业科技发展 有限公司、黑龙江省森林草原防火预警监测中心、黑龙江省林业科学研究院、黑龙江省森林植物园、大 兴安岭林下经济科技开发有限公司。 本文件主要起草人：赵恒田、臧丹丹、赵容健、宋维瑄、曲虹、刘淑华、冯雪婷、王宁、李金霞、 周玉迁、马德顺。 Ⅰ DB23/T 3025—2021 唐棣组培快繁技术规程 1 范围 本文件规定了唐棣（Amelanchier sinica ‘Xingye’）组培快繁的术语和定义、组织培养环境、培养基 配制、外植体制备、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗、移栽及生产档案。 本文件适用于唐棣组培快繁。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 组织培养环境 组织培养环境应符合 LY/T 1882 的规定。 5 培养基配制 5.1 培养基配方 培养基配方如下： a) 初代培养基：MS＋1.0 mg/L IBA＋1.5 mg/L 6-BA＋30 g/L 蔗糖＋固化剂，培养基灭菌前调制 pH 5.6～pH 5.8； b) 继代芽分化增殖培养基：MS＋1.0 mg/L IBA＋2.5 mg/L 6-BA＋2.0 mg/L GA3＋30 g/L 蔗糖＋固 化剂，培养基灭菌前调制 pH 5.6～pH 5.8； c) 生根培养基：MS＋0.1 mg/L NAA＋0.2g/L 活性炭+30 g/L 蔗糖＋固化剂，培养基灭菌前调制 pH 5.6～pH 5.8； 5.2 培养基灭菌 培养基配制后10 h内完成灭菌，采用高压蒸汽灭菌，在压力0.105 MPa、温度121 ℃条件下灭菌20 min～30 min。 5.3 培养基保存 1 DB23/T 3025—2021 培养基应保存于洁净环境中，注意避光和防尘。灭菌后的培养基在常温条件可保存7 d，2 ℃～4 ℃ 条件下可保存14 d。 6 外植体制备 6.1 外植体选择 选择生长发育良好、无病虫害、无机械损伤的植株作为采样母株，剪取带芽的茎段作为外植体，采 集时间以晴天上午为宜。 6.2 外植体消毒 将外植体流水冲洗1 h～2 h。在超净工作台上用70%酒精浸泡消毒8 s～15 s。倒去酒精后，用无菌 水冲洗外植体3 次～4 次。用0.1% HgCl2浸泡5 min～8 min。无菌水冲洗4 次～6 次。用无菌滤纸吸干 外植体表面的水分。 7 诱导培养 将消毒后的外植体剪成 1.5 cm～2 cm 带有 1 个～2 个芽的茎段，将剪好的茎段芽尖朝上插入诱导 培养基中，深度 0.5 cm，置于光下培养 20 d～25 d，光照周期 10 h/d～12 h/d、光照强度 1500 Lux～ 2000 Lux，培养温度 22 ℃～28 ℃，空气相对湿度 70%～80%。 8 增殖培养 分化的芽接入增殖培养基中，光照培养 30 d～35 d，光照周期 10 h/d～12 h/d、光照强度 3000 Lux～ 5000 Lux，培养温度 22 ℃～28 ℃，空气相对湿度 70%～80%。待形成芽丛，分割新长出的不定芽，可 按需求重复继代。 9 生根培养 选取培养瓶中长度 1.5 cm～3 cm 生长健壮的芽接种至生根培养基中，光照培养 60 d～90 d，光照 周期 10 h/d～12 h/d、光照强度 3000 Lux～5000 Lux，培养温度 22 ℃～28 ℃，空气相对湿度 70%～ 80%。 10 炼苗 10.1 炼瓶苗 组培苗高度3 cm～4 cm，基部长出≥3条、长2 cm～3 cm的新根时，进行炼苗。 10.2 封瓶炼苗 将培养瓶转移到日光温室中，散射光封口炼苗3 d～7 d，温度控制在20 ℃～25 ℃。 10.3 开瓶炼苗 将培养瓶盖旋松透气，1 d 后揭去瓶盖，炼苗 2 d～4 d。 11 移栽 11.1 移栽准备 2 DB23/T 3025—2021 将黑壤土、草碳土和细河沙过细筛，以 2：1：1 的体积比混匀后，装入规格为 35 cm×50 cm×7 cm 的育苗盘中。浇透水。将苗盘浸入 0.5 g/L 的多菌灵溶液中消毒。 11.2 移栽 取出组培苗，用清水洗净基部培养基，在散射光下移栽至育苗盘中。 11.3 移栽后管理 移栽初期，保持空气湿度≥80%，适时浇水，保持基质湿润，温度控制在18 ℃～25 ℃，逐步增加 光照。其他管理按LY/T 1882的规定执行。 12 生产档案 应建立组培苗生产档案，内容包括：组织培养环境、培养基配制、外植体制备、诱导培养、增殖培 养、生根培养、炼苗及移栽等。 3