(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210986685.6 (22)申请日 2022.08.17 (71)申请人 广东科润环保科技有限公司 地址 523000 广东省东莞 市茶山镇增卢路 85号1号楼101室 (72)发明人 赖国锋　 (74)专利代理 机构 北京深川专利代理事务所 (普通合伙) 16058 专利代理师 李焕焕 (51)Int.Cl. A01N 63/20(2020.01) A01N 37/36(2006.01) A01P 1/00(2006.01) C12N 1/20(2006.01) (54)发明名称 一种基于乳酸菌群的农业微生物抗菌剂及 其制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种基于乳酸菌群的农业微 生物抗菌剂及其制备方法， 配方包括： 乳酸菌、 柠 檬酸菌、 柠檬酸、 复合缓冲盐、 抑制剂、 琼脂粉和 费氏丙酸杆菌； 各组分的重量份数分别是： 50～ 60份的乳酸菌、 7～13份的柠檬 酸、 25～35份的复 合缓冲盐、 0.5～0.8份的抑制剂、 60～70份的琼 脂粉和5～7份的费氏丙酸杆菌， 本发明， 通过制 备的乳酸菌群产生乳酸来抑制病菌的生长， 起到 抗菌的作用， 通过对固体培养基进行高温灭活， 保障了有益菌类的正常活化， 提高了菌剂的制备 效率， 扩增培养时加入麦芽汁加速了乳酸的分解 过程， 避免乳酸抑制菌群的扩增， 保障了制备后 的抗菌剂质量， 通过对菌剂进行浓缩处理， 消除 了菌剂中多余的水分， 提高了制备后抗菌剂的实 用效果。 权利要求书2页 说明书6页 附图1页 CN 115399337 A 2022.11.29 CN 115399337 A 1.一种基于乳酸菌群的农业微生物抗菌剂， 配方包括： 乳酸菌、 柠檬酸菌、 柠檬酸、 复合 缓冲盐、 抑制剂、 琼脂粉和费氏丙酸杆菌； 其特征在于： 各组分的重量份数分别是： 50～60份 的乳酸菌、 7～13份的柠檬酸、 25～35份的复合 缓冲盐、 0.5～0.8份的抑制剂、 60～70份的琼 脂粉和5～7份的费氏丙酸杆菌 。 2.根据权利要求1所述的一种基于乳酸菌群的农业微生物抗菌剂， 其特征在于： 所述复 合缓冲盐由柠檬酸钠、 碳酸钙、 磷酸钾和醋酸钠混合而成， 且柠檬酸钠、 碳酸钙、 磷酸钾和醋 酸钠的重量比为5:3:3:1。 3.一种基于乳酸菌群的农业微生物抗菌剂制备方法， 包括以下步骤： 步骤一， 原料称 取； 步骤二， 活化灭菌； 步骤三， 活化培养； 步骤 四， 离心分离； 步骤五， 扩增 培养； 步骤六， 压 缩制剂； 其特 征在于： 其中上述步骤一中， 按照各组分的重量份数分别称取50～60份的乳酸菌、 7～ 13份的柠 檬酸、 25～35份的复合缓冲盐、 0.5～0.8份的抑制剂、 60～70份的琼脂粉和5～7份的费氏丙 酸杆菌， 备用； 其中上述步骤二中， 分别向三支试管中加入相同质量份数的固体培养基， 随后将步骤 一中备好的琼脂粉和抑制剂均分为三份， 再分别加入装有固体培养基的试管中， 接着将三 支试管放入灭菌室中进行灭菌处理， 之后取出进行冷却处理， 冷却后向三支试管中分别加 入步骤一中备好的乳酸菌、 柠檬酸菌和费氏丙酸杆菌， 分布得到乳酸菌活化基体、 柠檬酸菌 活化基体和费氏丙酸杆菌活化基 体， 备用； 其中上述步骤三中， 将步骤二中备好的乳酸菌活化基体、 柠檬酸菌活化基体和费氏丙 酸杆菌活化基体分别放入振荡培养箱中进行恒温活化， 活化后分别得到乳酸菌悬浊液、 柠 檬酸菌悬 浊液和费氏丙酸杆菌悬 浊液， 备用； 其中上述步骤四中， 将上述步骤三中备好的乳酸菌悬浊液、 柠檬酸菌悬浊液和费氏丙 酸杆菌悬浊液分布放入高速离心机中进行离心分离， 离心分离后分别得到乳酸菌菌剂、 柠 檬酸菌菌剂和费氏丙酸杆菌菌剂， 然后将乳酸菌菌剂、 柠檬酸菌菌剂和费氏丙酸杆菌菌剂 放入搅拌箱中， 并加入步骤一中备好的柠檬酸， 随后进 行恒温搅拌， 恒温搅拌后得到复配菌 剂液， 备用； 其中上述步骤五中， 向培养皿中加入MRS液体培养基， 然后将培养皿放入灭菌室中进行 灭菌处理， 之后取出进行冷却处理， 冷却后向培养皿中加入步骤四中备好的复配菌剂液和 步骤一中备好的复合缓冲盐， 再加入质量份数为50～60份的麦芽汁， 之后放入恒温室中进 行扩散培养， 扩散培养后得到 菌群制剂， 备用； 其中上述步骤六中， 将上述步骤五中备好的菌群制剂放入高速离心机中进行离心处 理， 之后将分离后的上清液倒入压缩机中进行浓缩处理， 浓缩处理后得到基于乳酸菌群的 农业微生物抗菌剂。 4.根据权利要求3所述的一种基于乳酸菌群的农业微生物抗菌剂制备方法， 其特征在 于： 所述步骤二中， 向每支试管中加入固体培养基的质量份数为7500～8000份， 灭菌处理的 温度为120～122℃， 灭菌处理的时间为0.2～0.3h， 冷却处理将试管中固体培养基的温度降 低至25～ 28℃。 5.根据权利要求3所述的一种基于乳酸菌群的农业微生物抗菌剂制备方法， 其特征在 于： 所述步骤三中， 在振荡培养箱 中进行恒温活化时， 振荡培养箱中的温度为28～30℃， 振权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115399337 A 2荡培养箱中的摇床转速为13 5～150r/min， 恒温活化的时间为70～72h 。 6.根据权利要求3所述的一种基于乳酸菌群的农业微生物抗菌剂制备方法， 其特征在 于： 所述步骤四中， 离心分离时高速离心机中的温度为35～38℃， 离心转速为 1280～1350r/ min， 离心分离的时间为0.05～0.08h， 恒温搅拌时的温度为35～38℃， 搅拌转速为35～ 50r/ min， 恒温搅拌0.2 ～0.3h。 7.根据权利要求3所述的一种基于乳酸菌群的农业微生物抗菌剂制备方法， 其特征在 于： 所述步骤五中， 加入MRS液体培养基的质量份数为5500～6000份， 灭菌处理的温度为120 ～122℃， 灭菌处理的时间为0.2～0.3h， 冷却处理将试管中MRS液体培养基的温度降低至25 ～28℃， 扩散 培养的温度为3 5～42℃， 且 扩散培养的时间为7.5～8h 。 8.根据权利要求3所述的一种基于乳酸菌群的农业微生物抗菌剂制备方法， 其特征在 于： 所述步骤六中， 离心处理时高速离心机中的温度为35～38℃， 离心转速为 1280～1350r/ min， 离心处 理的时间为0.0 5～0.08h， 压缩机使用的是厚度为0.2 μm的浓 缩循环过 滤膜。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115399337 A 3