(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210607515.2 (22)申请日 2022.05.31 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.23386 2021.09.10 (71)申请人 湖南农业大 学 地址 410125 湖南省长 沙市芙蓉区农大路1 号 (72)发明人 刘壮壮　方俊　石琳　 (74)专利代理 机构 长沙楚为知识产权代理事务 所(普通合伙) 43217 专利代理师 苗雅娟 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/02(2006.01) C02F 3/34(2006.01)C12R 1/22(2006.01) C02F 103/20(2006.01) C02F 101/16(2006.01) (54)发明名称 一种密歇根克 雷伯氏菌及其产品与应用 (57)摘要 本发明公布了一种密歇根克雷伯氏菌及其 产品与应用， 其特征在于， 所述密歇根克雷伯氏 菌的名称为KlebsiellamichiganensisWF ‑2， 其 在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物 中心的保藏编号为CGMCCNO.23386。 本发明中的 密歇根克雷伯氏菌从猪场废水中富集， 分离和纯 化得到， 对废水中氨氮的降解率最高能达到 92.37％， 体现出良好的降解作用， 具有专一性 强、 耗时短、 去除效率高的特点， 可应用于去除或 降低氨氮在 环境中的残留， 为氨氮残留 问题提供 安全， 环保的微 生物降解法。 权利要求书1页 说明书7页 序列表2页 附图4页 CN 114958669 A 2022.08.30 CN 114958669 A 1.一种密歇根克雷伯氏菌， 其特征在于， 所述密歇根克雷伯氏菌的名称为Klebsiella   michiganensis  WF‑2， 其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为 CGMCC NO.23386。 2.根据权利要求1所述的一种密歇根克雷伯氏菌， 其特征在于， 所述密歇根克雷伯氏菌 的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 3.根据权利要求1或2所述的一种密歇根克雷伯氏菌， 其特征在于， 所述密歇根克雷伯 氏菌从含有活性污泥的猪场废水中富集， 分离和纯化得到， 所述富集和分离过程中的培养 温度为28 ‑30℃， 所述培 养时间为20 ‑24h。 4.根据权利要求3所述的一种密歇根克雷伯氏菌， 其特征在于， 所述密歇根克雷伯氏菌 富集， 分离和纯化过程中所使用的础培 养基为包 含氯化铵的LB培 养基。 5.根据权利要求3所述的一种密歇根克雷伯氏菌， 其特征在于， 所述密歇根克雷伯氏菌 富集， 分离和纯化过程中所使用的的筛选培养基为包含乙酸钠、 七水硫酸镁、 磷酸氢二钾、 氯化钠、 硫酸锰、 硫酸 亚铁以及氨 氮溶液的培养基。 6.根据权利要求3所述的一种密歇根克雷伯氏菌， 其特征在于， 所述密歇根克雷伯氏菌 富集， 分离和纯化过程中所使用的模拟废水中的碳源包含葡萄糖、 蔗糖、 淀粉、 乙酸钠、 丁二 酸钠或碳 酸氢钠中的至少一种， 所述模拟 废水中的碳氮比为3 ‑15:1。 7.如权利要求1 ‑6任一所述的密歇根克 雷伯氏菌在降解废水中氨 氮的应用。 8.根据权利要求7所述的密歇根克雷伯氏菌在降解废水中氨氮的应用， 其特征在于， 所 述密歇根克雷伯氏菌在降解废水中氨氮的过程中， 降解溶液的pH值为6 ‑8， 降解温度为20 ‑ 40℃， 废水中氨 氮的初始浓度为10 0‑900mg/L， 密歇根克 雷伯氏菌的接种量 为0.5％‑10％。 9.一种用于降解废水中氨氮的菌剂， 其特征在于， 所述降解废水中氨氮的菌剂中含有 如权利要求1 ‑6任一所述的密歇根克 雷伯氏菌 。 10.根据权利要求9所述的一种用于降解废水中氨氮的菌剂， 其特征在于， 所述降解废 水中氨氮的菌剂的制备方法为将所述密歇根克雷伯氏菌用液体培养基进 行活化培养后， 收 集培养液即得。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114958669 A 2一种密歇根克雷伯氏菌及其产品与应用 技术领域 [0001]本发明属于废水中氨氮的生物降解技术领域， 具体涉及 一种密歇根克雷伯氏菌及 其产品与应用。 背景技术 [0002]未经处理的畜禽养殖废水所引发的氮污染尤为严重， 其中以氨氮污染最为突出。 含高浓度氨氮的畜禽废水直接排入水体中， 废水中的氨氮在硝化菌的作用下， 被氧化转变 为硝态氮和亚硝态氮， 1mg氨氮完全氧化大约需要消耗4.6mg溶解氧， 大量的溶解氧消耗导 致水体溶解氧含量急剧下降。 水体中过多的氮也会增加 光合微生物(主要是藻类)的数量， 使富营养化现象出现， 导致水体发黑发臭， 透明度下降， 水质环境恶化， 促使水中鱼类和其 他生物大量死 亡。 [0003]我国太湖污染源的调查显示， 畜禽养殖废水是造成太湖流域氮污染以及富营养化 的重要污染源之一。 当使用含高浓度 氨氮的畜禽废水灌溉农田时， 则会导致土壤孔隙堵塞， 使土壤透气性， 透水性降低， 土壤质量恶化， 造成植物减产甚至死亡。 水中过量的氮元素若 不能被有效吸 收， 极易流失到地表水中或通过透气性土壤淋溶到地下 水中， 造成水体污染。 [0004]中国发明专利CN110452836A提供了一株降解氨氮的微生物菌株， 所述菌株为养料 嗜冷杆菌(Psychrobacter  cibarius)Z ‑XWW G， 所述养料嗜冷杆菌(Psychrobacter   cibarius)Z ‑XWW G保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏编号为 CGMCC No.17515， 以及漳州芽孢杆菌(Bacillus  zhangzhouen sis)Z‑XWW 77， 所述漳州芽孢 杆菌(Bacilluszh angzhouensis)Z ‑XWW 77保藏于 中国微生物菌种保藏管理委员会普通微 生物中心， 保藏编号为CGMCC  No.17516， 对比文件还提供了上述菌株以及包含上述菌株的 复合微生物在降解氨氮中的应用， 但是对比文件中的复合微生物菌群处理废水中氨氮的效 率较低。 发明内容 [0005]为了克服现有技术中的问题， 本申请提供一种密歇根克雷伯氏菌及其产品与应 用， 具体方法是从猪场 废水中筛选出一株专一性 强、 耗时短、 去除效率高的能够降解废水中 氨氮的降解菌， 为处 理畜禽养殖废水提供丰富的微 生物资源。 [0006]为了实现上述目的， 本发明通过以下技 术方案实现： [0007]本发明第一方面提供一种密歇根克雷伯氏菌， 所述密歇根克雷伯氏菌的名称为 Klebsiella  michiganensis  WF‑2， 其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 的保藏编号 为CGMCC NO.23386。 [0008]作为一种可选的实施方式， 本发明提供密 歇根克雷伯氏菌的核苷酸序列如SEQ  ID  NO.1所示。 [0009]作为一种可选的实施方式， 本发明提供密 歇根克雷伯氏菌从含有活性污泥的猪场 废水中富集， 分离和纯化得到， 所述富集和分离过程中的培养温度为28 ‑30℃， 所述培养时说　明　书 1/7 页 3 CN 114958669 A 3