(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210831840.7 (22)申请日 2022.07.14 (71)申请人 微康益生菌 （苏州） 股份有限公司 地址 215200 江苏省苏州市吴江经济技 术 开发区龙桥路10 33号 (72)发明人 方曙光　严涛　陈珂可　蒋大成　 冯胜鹏　朱建国　 (74)专利代理 机构 北京品源专利代理有限公司 11332 专利代理师 边人洲 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) (54)发明名称 一种提升益生菌的自身功效及富硒能力的 培养方法及其应用 (57)摘要 本发明涉及一种提升益生菌的自身功效及 富硒能力的培养方法及其应用， 所述培养方法包 括如下步骤： 将活化后的菌株接种到发酵培养基 中进行发酵培养， 在发酵培养过程中流加补料， 所述补料包括硒原料、 氨基酸及其盐、 营养元素 和富硒促进剂。 本发明所涉及的培养方法不仅能 提高益生菌的富硒能力， 还能促进益生菌菌体自 身功效的发挥， 具有重要的应用价 值。 权利要求书2页 说明书13页 CN 115141775 A 2022.10.04 CN 115141775 A 1.一种提升益生菌的自身功效及富硒能力的培养方法， 其特征在于， 所述培养方法包 括如下步骤： 将活化后的菌株接种到发酵培养基中进行发酵培养， 在发酵培养过程中流加补料， 所 述补料包括硒原料、 氨基酸及其盐、 营养元 素和富硒促进剂； 所述硒原料包括硒代半胱氨酸； 所述氨基酸及其盐包括精氨酸、 赖氨酸、 天冬氨酸、 半 胱氨酸盐酸盐或谷氨酸中的任意一种或至少 两种的组合； 所述营养元素包括硫酸亚铁、 硫 酸锰、 硫酸镁、 硫酸锌、 氯化钙、 氯化钠或 氯化钾中的任意一种或至少两种的组合； 所述富硒 促进剂包括 维生素C、 维生素E、 没食子酸丙酯、 谷胱苷肽或肌 醇中的任意一种或至少两种的 组合。 2.如权利要求1所述的提升益生菌的自身功效及富硒能力的培养方法， 其特征在于， 所 述氨基酸及其盐包括谷氨酸和L ‑半胱氨酸盐酸盐； 优选地， 所述谷氨酸与L ‑半胱氨酸盐酸盐的质量比为(5 ‑15):1。 3.如权利要求1或2所述的提升益生菌的自身功效及富硒能力的培养方法， 其特征在 于， 所述营养元 素包括硫酸 亚铁、 硫酸锰、 硫酸镁、 硫酸锌、 氯化钙、 氯化钠和氯化钾； 优选地， 所述营养元素以重量份数计包括硫酸亚铁0.10 ‑0.25份、 硫酸锰0.010 ‑0.025 份、 硫酸镁2.0 ‑4.5份、 硫酸锌1.5 ‑2.5份、 氯化钙0.5 ‑1.0份、 氯化钠0.5 ‑1.5份和氯化钾 1.5‑3.5份。 4.如权利要求1 ‑3中任一项所述的提升益生菌的自身功效及富硒能力的培养方法， 其 特征在于， 所述 富硒促进剂包括肌醇、 维生素E和没食子酸丙酯； 优选地， 所述肌醇、 维生素E与没食子酸丙酯的质量比为1:(1 ‑4):(1‑5)。 5.如权利要求1 ‑4中任一项所述的提升益生菌的自身功效及富硒能力的培养方法， 其 特征在于， 所述 流加补料 是指当菌株生长 到对数期初期时开始进行， 至对数期末期停止； 优选地， 所述补料还 包括碳源； 优选地， 所述 碳源包括葡萄糖； 优选地， 所述 碳源的流加速度为5 ‑20g/L/h； 优选地， 所述硒原料的流加速度为71 ‑140mg/L/ h； 优选地， 所述氨基酸及其盐的流加速度为0.5 ‑1.5g/L/h； 优选地， 所述营养元 素的流加速度为6 ‑14g/L/h； 优选地， 所述 富硒促进剂的流加速度为2 ‑10g/L/h。 6.如权利要求1 ‑5中任一项所述的提升益生菌的自身功效及富硒能力的培养方法， 其 特征在于， 所述发酵培 养的温度为32 ‑40℃； 优选地， 所述发酵培 养的时间为15 ‑20h； 优选地， 所述发酵培 养基包括MRS培 养基。 7.如权利要求1 ‑6中任一项所述的提升益生菌的自身功效及富硒能力的培养方法， 其 特征在于， 所述益生菌包括青春双歧杆菌、 动物双歧杆菌、 两歧双歧杆菌、 短双歧杆菌、 婴儿 双歧杆菌、 长双歧杆菌、 嗜酸乳杆菌、 干酪乳杆菌、 卷曲乳杆菌、 德氏乳杆菌、 发酵乳杆菌、 格 氏乳杆菌、 瑞士乳杆菌、 约氏乳杆菌、 副干酪乳杆菌、 植物乳杆菌、 罗伊氏乳杆菌、 鼠李糖乳 杆菌、 唾液乳杆菌、 嗜热链球菌、 乳酸乳球菌、 费氏丙酸杆菌、 肠膜明串珠菌、 马克斯克鲁维 酵母、 乳酸片球菌、 戊糖片球菌、 凝结芽孢杆菌、 清酒乳杆菌或产丙酸丙酸杆菌中的任意一权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115141775 A 2种或至少两种的组合。 8.一种富含硒的益生菌冻干粉， 其特征在于， 所述富含硒的益生菌冻干粉的制备原料 包括由如权利要求 1‑7中任一项所述的提升益生菌的自身功效及富硒能力的培养方法培养 得到的益 生菌培养物和冻干保护剂。 9.如权利要求8所述的富含硒的益生菌冻干粉， 其特征在于， 所述冻干保护剂包括海藻 糖、 蔗糖或甘油中的任意 一种或至少两种的组合； 优选地， 所述冻干保护剂以重量份数计包括海藻糖10 ‑20份、 蔗糖2 ‑7份和甘油2 ‑5份； 优选地， 所述 富含硒的益 生菌冻干粉由包括如下步骤的制备 方法制备 得到： 利用如权利要求1 ‑7中任一项所述的培养方法培养益生菌， 得发酵培养液， 离心， 收集 菌泥， 与冻干保护剂混合， 冻干， 即得。 10.由如权利要求1 ‑7中任一项所述的提升益生菌的自身功效及富硒能力的培养方法 培养得到的益生菌培养物或如权利要求8 ‑9中任一项 所述的富含硒的益生菌冻干粉在制备 增强免疫力和/或抗氧化的食品、 保健品、 药品或化妆品中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115141775 A 3