(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211149109.2 (22)申请日 2022.09.21 (71)申请人 北京三药 科技开发公司 地址 100176 北京市北京经济技 术开发区 建安街甲2号1幢二层 (72)发明人 赵卓　董姣姣　杨江威　王金恒　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 薛红凡 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/38(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种提高人参土芽孢杆菌回收率和生长速 率的培养基添加剂和改良培 养基及应用 (57)摘要 本发明属于微生物 技术领域， 具体涉及一种 提高人参土芽孢杆菌回收率和生长速率的培养 基添加剂和改良培养基及应用。 本发 明提供的提 高人参土芽孢杆菌回收率和生长速率的培养基 添加剂包括镁离子、 钙离子和钾离子； 所述镁离 子在培养基中的浓度为0.1～0.4mg/mL， 所述钙 离子在培养基中的浓度为0.0036～ 0.072mg/mL， 所述钾离子在培养基中的浓度为0 .0287～ 0.431mg/mL。 实施例 结果表明： 应用培养基添加 剂人参土芽孢杆菌在3d的回收率由原来的13％ 大幅度提高至50％～172％， 可以提高人参芽孢 杆菌的检出率。 可见， 本发明的提高人参土芽孢 杆菌回收率和生长速率的培养基添加剂应用效 果好。 权利要求书1页 说明书11页 附图1页 CN 115404188 A 2022.11.29 CN 115404188 A 1.一种提高人参土芽孢杆菌回收率和生长速率的培养基添加剂， 其特征在于， 所述培 养基添加剂包括镁离子、 钙离子和钾离子； 所述镁离子在培养基中的浓度为0.1mg/mL～ 0.4mg/mL， 所述钙离子在培养基中的浓度为0.0036mg/mL～0.0 72mg/mL， 所述钾离子在培养 基中的浓度为0.0287mg/mL～0.431mg/mL。 2.根据权利要求1所述的培养基添加剂， 其特征在于， 所述镁离子的提供物包括二价镁 离子化合物； 所述钙离子的提供物包括二价钙离子化合物； 所述钾离子的提供物包括磷酸 氢二钾和/或磷酸 二氢钾。 3.根据权利要求2所述的培养基添加剂， 其特征在于， 所述二价镁离子化合物包括氯化 镁和/或硫酸镁； 所述 二价钙离子化合物包括氯化钙。 4.权利要求1～3任一项所述的培养基添加剂在提高人参土芽孢杆菌回收率和生长速 率中的应用。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 应用将含有人参土芽孢杆菌的菌悬液接种 于添加培 养基添加剂的改良培 养基中。 6.一种提高人参土芽孢杆菌回收率和生长速率的改良培养基， 其特征在于， 所述培养 基包括基础培养基和权利要求 1～3任一项 所述培养基添加剂； 所述改良培养基中镁离子浓 度为0.1mg/mL～0.4mg/mL， 钙离子浓度为0.0036mg/mL～0.072mg/mL， 钾离子浓度为 0.0287mg/mL～0.431mg/mL。 7.根据权利要求6所述的改良培养基， 其特征在于， 所述基础培养基为非选择性固体培 养基。 8.根据权利要求7所述的改良培养基， 其特征在于， 所述非选择性固体培养基包括胰酪 大豆胨琼脂 培养基或营养琼脂 培养基。 9.根据权利要求6所述的改良培养基， 其特征在于， 当所述基础培养基为胰酪大豆胨琼 脂培养基时， 所述改良培养基中胰酪大豆胨琼脂培养基的浓度为40mg/ mL； 当所述基础培养 基为营养琼脂 培养基时， 所述改良培 养基中营养琼脂 培养基的浓度为3 3mg/mL。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115404188 A 2一种提高人参 土芽孢杆菌回收 率和生长速率的培养基 添加剂 和改良培养基 及应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物技术领域， 具体涉及一种提高人参土芽孢杆菌回收率和生长速 率的培养基添加剂和改良培 养基及应用。 背景技术 [0002]非选择性固体培养基是指 “非选择性分离和计数固体培养基 ”即营养成分齐全， 无 抑制成分的培养基。 现阶段应用的非选择性固体培养基包括胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA) 和营养琼脂培养基(NA)。 如胰酪大豆胨琼脂培养基TSA  是需氧菌检测、 环境检测的普遍常 用培养基， 有良好的检出率和灵敏度。 在对  TSA适用性检查时， 要对 《中国药典》 以及ICH中 要求的五株自然环境中最为常见的微生物有良好的回收率和生长速率， 这五株常见标准菌 株包含革兰氏阳性球菌、 杆菌、 革兰氏阴性菌、 芽孢杆菌和真菌， 但是在实际应用中环境或 样品中的污染菌远大于这五种常见标准菌株的种类， 因此增加TSA适用性试验的控制菌是 有必要的。 而人参土芽孢杆菌在不同厂家的胰酪大豆胨琼脂培养基  (TSA)适用性检查中， 它的回收率和生长 速率差异较大， 经常出现人参土 芽孢杆菌漏检的情况。 [0003]现有技术中人参土芽孢杆菌在常规的非选择性固体培养基中生长微弱， 经常存在 人参土芽孢杆菌漏检的情况， 从而导致误判。 因此， 急需一种提高人参土芽孢杆菌回收率和 生长速率的培 养基添加剂， 提高人参土 芽孢杆菌的检出率和检测灵敏度。 发明内容 [0004]本发明的目的提供一种提高人参土芽孢杆菌回收率和生长速率的培养基添加剂， 本发明提供的培养基添加剂能够提高人参土芽孢杆菌的回收率和生长速率， 即使在人参土 芽孢杆菌的浓度很低时也能够检测出人参土芽孢杆菌， 从而提高了人参土芽孢杆菌的检测 灵敏度。 [0005]为了解决上述 技术问题， 本申请提出了以下技 术方案： [0006]本发明提供了一种提高人参土芽孢杆菌回收率和生长速率的培养基添加剂， 所述 培养基添加剂包括镁离子、 钙离子和钾 离子； 所述镁离子在培养基中的浓度为0.1mg/mL～ 0.4mg/mL， 所述钙离子在培养基中的浓度为0.0036mg/mL～0.0 72mg/mL， 所述钾离子在培养 基中的浓度为  0.0287mg/mL～0.431mg/mL。 [0007]优选的， 所述镁离子 的提供物包括二价镁离子化合物； 所述钙离子 的提供物包括 二价钙离子化合物； 所述钾离 子的提供物包括磷酸氢二钾 和/或磷酸 二氢钾。 [0008]优选的， 所述二价镁离子化合物包括氯化镁和/或硫酸镁； 所述二价钙离子化合物 包括氯化钙。 [0009]本发明还提供了一种培养基添加剂在提高人参土芽孢杆菌回收率和生长速率中 的应用。 [0010]优选的， 应用将含有人参土芽孢杆菌的菌悬液接种于添加培养基添加剂的培养基说　明　书 1/11 页 3 CN 115404188 A 3