ICS 67.160.10 CCS C 151 T/NAIA 团 体 标 准 T/ NAIA 0336—2024 葡萄和葡萄酒中 13种杀菌剂的测定 高效液相色谱 -串联质谱法 Determination of Thirteen Fungicide Residues in Grape and Wine HPLC-MS/MS 2024-11-25发布 2024-12-01实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0336—2024 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定 编写。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位 ：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞 及葡萄酒质量安全））、宁夏化学分析测试协会。 本文件主要起草人：汤丽华、朱燕燕、吕毅、马雪梅、王鹏、王泽岚、朱捷、吴明、马桂娟 、 张小飞。 全国团体标准信息平台 1葡萄和葡萄酒中 13种杀菌剂的测定 高效液相色谱 -串联质谱法 1范围 本文件规定了 葡萄和葡萄酒中 13种杀菌剂 （多菌灵 、稻瘟灵、苯霜灵、吡噻菌胺 、苯酰菌胺 、 吡唑醚菌酯、氟硅唑、氟吗啉、吡唑萘菌胺、氟环唑、氟吡菌酰胺、氟吡菌胺、恶霜灵 ）的高效液 相色谱 -串联质谱检测方法。 本文件适用 葡萄和葡萄酒中 13种杀菌剂的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法 GB 2763食品中农药最大残留限量 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样用乙腈涡旋振荡提取，取上清液，经分散固相萃取净化，用液相色谱 -质谱联用仪检测， 外标法定量。 5试剂和材料 本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯， 水为 GB/T 6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1.1乙腈：色谱纯。 5.1.2甲醇：色谱纯。 5.1.3乙酸铵：色谱纯。 5.1.4甲酸：色谱纯。 5.1.5氯化钠（ NaCl）：分析纯。 5.1.6无水硫酸镁（ MgSO 4）粉末： 粒径 50μm。 5.1.7 N-丙基乙二胺（ PSA）粉末 :粒径 50μm。 5.1.8 0.02%甲酸溶液：取甲酸（ 5.1.4）0.2mL，用水定容到 1000mL，摇匀。 5.1.9乙酸铵 -甲酸溶液（ 5mmol/L）：称取 0.385g乙酸铵， 用0.02%甲酸溶液（ 5.1.8）溶解并稀释 至1000mL，摇匀。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0336—2024 25.2标准品 多菌灵（纯度： ≥95%，CAS：10605-21-7 ）、稻瘟灵（纯度： ≥95%，CAS：50512-35-1 ）、苯 霜灵（纯度： ≥95%，CAS：71626-11-4 ）、吡噻菌胺（纯度： ≥95%，CAS：183675-82-3 ）、苯酰 菌胺（纯度： ≥95%，CAS：136052-68-5 ）、吡唑醚菌酯（纯度： ≥95%，CAS：175013-18-0 ）、氟 硅唑（纯度： ≥95%，CAS：85509-19-9 ）、氟吗啉（纯度： ≥95%，CAS：211867-47-9 ）、吡唑萘 菌胺（纯度： ≥95%，CAS：881685-58-1 ）、氟环唑（纯度： ≥95%，CAS：133855-98-8 ）、氟吡菌 酰胺（纯度： ≥95%，CAS：658066-35-4 ）、氟吡菌胺（纯度： ≥95%，CAS：239110-13-7 ）、恶霜 灵（纯度： ≥95%，CAS：77732-09-3 ），浓度均为 1.0mg/mL 。 5.3标准溶液配制 5.3.1混合标准储备液（ 10.0μg/mL ）：分别准确吸取 1.0mg/mL的13种杀菌剂 标准溶液各 100μL， 用乙腈（ 5.1.1）溶解并定容至 10.0mL，于 -18℃避光保存， 有效期 1个月。 5.3.2 基质混合标准工作溶液：分别准确吸取混合标准储备液（ 5.3.1）适量，用空白基质配制成浓 度为 1.0 ng/mL~300.0 ng/mL的标准工作液，临用现配。 6仪器和设备 6.1液相色谱 -串联质谱仪：配备电喷雾离子源 (ESI)。 6.2分析天平： 感量 0.1mg和0.01g。 6.3涡旋混合器。 6.4离心机： 最大转速 9000r/min 。 6.5 高速匀浆机： 转速不低于 10000r/min 。 6.6 有机微孔滤膜， 孔径 0.22μm，或相当者。 7分析步骤 7.1试样制备 7.1.1葡萄样品 葡萄样品的制备按照 GB 2763附录 A中的规定执行 。将样品混匀均一化制成匀浆 ，制备好的试 样均分成 2份，放入聚乙烯瓶中，密封并标明标记，于 -18℃冷冻保存。 7.1.2葡萄酒样品 取代表性样品摇匀分装，密闭常温或冷藏保存。 7.2测定步骤 7.2.1葡萄样品 称取 2g样品（精确至 0.01g）于50 mL离心管中， 加入 20mL乙腈（ 5.1.1）、 5g氯化钠 （5.1.5），涡旋震荡 5min，8000r/min 离心 5min。移取上清液至装有 600mg无水 MgSO 4（5.1.6） 和100 mgPSA（5.1.7）的离心管中， 涡旋混合 2min，8000 r/min离心 5 min，有机滤膜过滤后，供 全国团体标准信息平台