ICS 13.310 A 92 中 华人民 共和国 公共安 全行业 标准 GA GA/T × × × × －× × × × 法庭科学 血液、尿液 中米氮平 和氟西汀 检验 气相色谱和气相色谱 -质谱法 Forensic sciences —Examination m ethods for mirtazepine and fluoxetine in blood and urine samples—GC and GC -MS ×××× -×× -××发布 ×××× -×× -××实施 中华人民共和国公安部 发布 GA/T× × × × —× × × × I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 —2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（ SAC/TC 179/SC 1 ）提出并归口。 本标准起草单位： 北京市公安局 刑事侦查总队 。 本标准起草人：乔静、 张瑛、覃仕扬、 张文芳、杨继峰、 杨士云、刘永涛、杨继锋、张文芳 。 GA/T× × × × —× × × × 1 法庭科学 血液、尿液 中米氮平 和氟西汀检验 气相色谱 和气相色谱 -质谱法 1 范围 本标准规定了 法庭科学 血液、尿液 中米氮平和氟西汀的气相色谱（ GC）定量检验方法和气相色谱 - 质谱（ GC-MS）定性定量 检验方法。 本标准适用于 法庭科学 血液、尿液 中米氮平和氟西汀的定性分析和定量分析 。其他可疑 样品中米氮 平和氟西汀的定性分析和定量分析可参照使用 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用 水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对血液及尿液进行提取、净化及浓缩，采用气 相色谱法定量、气相色谱 -质谱法定性定量 ，以保留时间、质谱特征离子碎片峰和相对丰度 比作为定性 判断依据； 以峰面积为依据，采用外标法或内标法进行定量分析。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682 中规定的三级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯，试 剂包括： a) 乙腈； b) 正己烷； c) 无水硫酸钠； d) 1mol/mL 氢氧化钠溶液 ：称量 4.0g氢氧化钠 ，用水溶解，并稀释至 100mL； e) 标准溶液： 1) 1.0mg/mL 标准物质溶液 ：根据米氮平和氟西汀标准物质的纯度 及盐型换算后，各称取适 量，分别用甲醇配制 1.0mg/mL 灭多威和灭多威肟标准物质溶液，置于冰箱中冷藏保存。 有效期 6个月。或采用市售标准溶液 ； 2) 0.1mg/mL 混合标准工作 溶液（ 100.0µ g/mL ）：移取1.0mg/mL 米氮平和氟西汀标准物质 溶液各 1.0mL，用甲醇 定容至 10mL，混匀，密封，置于冰箱中冷藏 保存。有效期 3个月。 实验中所用 其他浓度的混合标准工作 溶液均由 0.1mg/mL标准物质溶液用甲醇稀释得到 ； GA/T× × × × —× × × × 2 3) 1.0mg/mL 内标溶液： 根据内标 普罗地芬 （ SKF 525A）标准物质 的纯度， 用甲醇配制 1.0mg/mL SKF 525A内标物质溶液，置于冰箱中冷藏保存。有效期 6个月。或采用市售标准溶液； 4) 0.1mg/mL 内标工作溶液：移取 1.0mg/mL 的内标 SKF 525A标准溶液 1.0mL，用甲醇定容至 10mL，混匀，密封，置于冰箱中冷藏保存 。有效期 3个月。实验中所用其他浓度的内标 溶液均由 0.1mg/mL内标溶液用 甲醇稀释得到。 注：特殊情况下可使用对照溶液代替标准溶液。 5.2 材料 材料包括： a) 具盖离心管； b) 具塞玻璃试管。 6 仪器和设备 仪器和设备包括： a) 气相色谱 -质谱仪： 配有电子轰击源（ EI）； b) 气相色谱仪：配有火焰离子化检测器（ FID）； c) 振荡器； d) 电子天平； e) 离心机； f) 浓缩器。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品提取 7.1.1.1 液液萃取 移取血液、尿液 检材样品 1.0mL～2.0mL于具盖离心管中（若采用内标法，则加入 内标 SKF 525A溶 液， 使内标浓度为 1.0µ g/mL，混匀），用 0.1mol/L的NaOH溶液调节 pH值至11，加入正己烷/乙腈（体 积比 98:2）混合溶剂 10mL，振荡 5min，8000r/min 离心 5min，分离有机相；重复提取一次，合并两次 提取的有机相 ，用无水硫酸钠（ 15g）脱水，收集滤液置于浓缩器上 80℃浓缩至干， 残留物用正己烷/ 乙腈（体积比 98:2）混合溶剂 0.2mL溶解，作为检材样品提取液 供GC-MS分析。 7.1.1.2 质控样品制备 取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用血液替代）两份于具盖 离心管中，一份作 为空白样品，一份添加米氮平和氟西汀标准品，作为添加样品（添加样品的浓度为 1.0µ g/mL ），与检 材样品平行操作，得到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器检测。 若采用内标法，不做添加样品，空白样品（不加内标）与检材平行操作， 供GC-MS分析。 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 仪器条件 （气相色谱 -质谱） 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整： a) 色谱柱： DB-5MS毛细色谱 柱（ 30m× 0.25mm× 0.25µ m ）或等效色谱柱 ； GA/T× × × × —× × × × 3 注： DB-5MS柱是Aglient公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该 产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱温程： 150℃保持 1min，以10℃/min 速率升温至 280℃，保持 15min； c) 进样口温度： 280℃； d) 传输线温度： 260℃； e) 载气：氦气； f) 进样方式：分流进样，分流比 10∶1； g) 电子轰击能量： 70eV； h) 离子源温度： 250℃； i) 倍增器电压：自动调谐值； j) 柱流量： 1mL/min ； k) 质量扫描范围： 40amu~450am u ； l) 扫描方式：全扫描（ Scan）。 7.1.2.2 进样 分别吸取检材、空白和添加样品提取液及标准工作溶液 （若采用内标法，分别吸取检材、空白和内 标工作溶液及标准工作溶液） ，按 7.1.2.1的分析条件进样分析。 7.2 定量分析 7.2.1 样品提取 准确量取血液 或尿液样品 1.0mL～2.0mL两份（若采用内标法，则加入内标 SKF 525A溶液，使内标浓 度为 1µ g/mL，混匀）， 按7.1.1进行操作。 另取等量相似基质的空白样品三份，其中两份分别添加米氮平和氟西汀标准物质作为添加样品（添 加样品中目 标物含量应为检材样品中目标物含量的 (100±50)%，若采用内标法，则添加样品中还需加入 内标 SKF 525A溶液，使内标浓度为 1µ g/mL，混匀），另一份作为空白样品，与检材样品平行操作，得到 空白样品提取液和添加样品提取液供仪器 分析。 7.2.2 仪器检测 7.2.2.1 仪器条件 7.2.2.1.1 气相色谱条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整： a) 检测器： FID； b) 色谱柱： DB-5毛细色谱 柱（ 30m× 0.25mm× 0.25µ m ）或等效色谱柱 ； 注： DB-5柱是Aglient公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产 品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 c) 色谱柱温程： 160℃保持 1min，以10℃/min 速率升温至 280℃，保持 20min； d) 进样口温度： 280℃； e) 检测器温度： 280℃； f) 载气：氮气； g) 进样方式：分流进样 ； h) 分流比： 10∶1； i) 柱流量： 1mL/min。 GA/T× × × × —× × × × 4 7.2.2.1.2 气相色谱 -质谱条件 按7.1.2.1规定的条件分析。 7.2.2.2 进样 分别吸取检材、 空白和添加样品提取液及标准工作溶液 （若采用内标法，还需进样内标工作溶液） ， 按7.2.2.1的分析条件每个样品进样分析