ICS 13.310 CCS A 92 GA 法庭科学 生物检材中 89种农药及代谢物 筛选 气相色谱 -质谱法 Forensic sciences —Screening methods for 89 pesticides and metabolite s in biological samples —GC-MS ×××× -×× -××发布 ×××× -×× -××实施 中华人民共和国公安部 发布 GA/T × × × × －× × × × 中 华人民 共和国 公共安 全行业 标准 GA/T × × × ×—× × × × I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（ SAC/TC179/SC1 ）提出并归口。 本文件起草单位： 公安部物证鉴定中心、 浙江省公安厅 刑事侦查总队 、重庆市公安局物证鉴定中心 、 广西壮族自治区公安厅刑事侦查总队、 内蒙古自治区公安厅 、杭州市公安局、 江西省宜春市公安局 。 本文件主要起草人 ：张云峰、董林沛、魏春明、常靖、傅得锋、孙剑聪、王俊伟、石银涛、黄克建、 刘晓锋、张强、 应剑波、 任昕昕、王爱华、吴小军、王瑞花、于忠山 、易伟。GA/T × × × ×—× × × × 1 法庭科学 生物检材中 89种农药及代谢物 筛选 气相色谱 -质谱法 1 范围 本文件规定了法庭科学 生物检材 血液、尿液中89种农药及代谢物 的气相色谱 -质谱（ GC-MS）和气 相色谱 -串联质谱 （GC-MS/MS）筛选方法。 本文件适用于法庭科学 生物检材血 液、尿液中89种农药及代谢物 的定性分析。其他检材可参照使用 。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可 少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对 检材样品中 89种农药及代谢物（详见附录 A）进行提取、净化及浓缩后，用 GC-MS或GC-MS/MS方法进行检测，以保留时间、质谱特征离子和 丰度比作为定性判断依据 。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水 应符合 GB/T 6682 中规定的三级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯，试 剂包括： a) 乙醇； b) 乙酸乙酯 ； c) 甲醇； d) 标准溶液： 1) 1.0mg/mL 单一标准物质储备溶液 ：分别精密称取标准 物质，用甲醇（根据农药在溶剂中 的溶解性选择） 配成 1mg/mL的标准物质储备溶液 或采用市售标准溶液 ，密封， -18℃以下 保存，有效期 12个月； 2) 10μg /mL单一标准物质 工作溶液：移取 1.0mg/mL 标准物质 储备溶液 ，用甲醇配制成浓度为 10μg /mL的单一标准 物质工作溶液 ，密封， 0℃~4℃保存，有效期3个月； 3) 10μg /mL混合标准 物质工作溶液：精确量取 1.0mg/mL 单一标准物质 储备溶液 ，用甲醇配制 成 10μg /mL混合标准物质工作溶液，密封， 0℃~4℃保存。试验中所用其 他浓度的标准溶 液均从上述储备溶液用甲醇稀释得 到，密封， 0℃~4℃保存，有效期 3个月； GA/T × × × ×—× × × × 2 4) 100μg/mL混合标准质控工作 溶液：准确移取 灭多威肟 、敌敌畏、久效磷、甲基对硫磷、 甲氰菊酯、溴氰菊酯等六种农药的 1.0mg/mL标准物质储备溶液 ，用甲醇 配制成浓度为 100μg/mL混合标准质控工作 溶液，密封， 0℃~4℃保存，有效期 6个月； 5) 10μg/mL混合标准质控工作 溶液：准确移取 灭多威肟 、敌敌畏、久效磷、甲基对硫磷、甲 氰菊酯、溴氰菊酯等六种农药的 1.0mg/mL标准物质储备溶液 ，用甲醇 配制成浓度为 10μg/mL混合标准质控工作 溶液，密封， 0℃~4℃保存，有效期 3个月； 6) 50ng/mL串联质谱质控标准溶液：准确移取 灭多威肟 、敌敌畏、久效磷、甲基对硫磷、甲 氰菊酯、溴氰菊酯等六种农药的 10μg/mL 混合标准质控工作 溶液，用甲醇 配制成浓度为 50ng/mL串联质谱质控标准溶液 ，现用现配 ； 7) 5.0µ g/mL单级质谱质控标准溶液：准确移取 灭多威肟 、敌敌畏、久 效磷、甲基对硫磷、 甲氰菊酯、溴氰菊酯等六种农药的 10μg/mL 混合标准质控工作 溶液，用甲醇 配制成浓度 为5.0µ g/mL单级质谱质控标准溶液 ，现用现配 。 注：根据实际情况，可适当调整质控标准溶液中 农药的种类。 5.2 材料 材料包括： a) 具盖离心管 ； b) 具塞玻璃试管。 6 仪器与设备 仪器和设备包括： a) 气相色谱 -质谱仪：配有电子轰击源（ EI）； b) 气相色谱 -串联质谱仪：配有电子轰击源（ EI）； c) 振荡器； d) 电子天平： 实际分度值 d≤0.01mg； e) 离心机； f) 振荡器； g) 浓缩器； h) 移液器。 7 操作方法 7.1 样品提取 7.1.1 液液萃取 移取血、尿等液体样品 2mL，于具盖离心管中， 加入乙酸乙酯 6mL，振荡 5min，不低于 5000rpm离 心10min，分离有机相；重复提取 一次，合并 两次提取的 有机相，置于浓缩器上 在45℃以下浓缩 至近干， 残留物用 100µL乙醇溶解，作为检材样品提取液 ，供仪器检测 。 注：检材样品取样量、溶剂体积及定容体积可根据实际情况调整。 7.1.2 质控样品制备 取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用血液替代） 两份于具盖离心管中，一份作GA/T × × × ×—× × × × 3 为空白样品， 一份添 加100μg/mL (GC-MS)或10μg/mL (GC-MS/MS)混合标准质控工作溶液 ，使灭多威肟 、 敌敌畏、久效磷、甲基对硫磷、甲氰菊酯、溴氰菊酯 浓度为 1μg/mL(GC -MS)或50ng/mL(GC -MS/MS)， 作为添加样品，与检材样品平行操作，得到空白样品提取液和添加样品提取液，供仪器检测。 注：根据实际情况，可适当调整质控标准溶液中农药的种类 。 7.2 仪器检测 7.2.1 气相色谱 -质谱仪条件 以下为 GC-MS参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整： a) 色谱柱： DB-5MS石英玻璃毛细柱（ 30m× 0.25mm× 0 .25µ m)或其他等效柱； 注： DB-5MS柱是 Agilent 公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的 认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱温程： 80℃保持 2min，以 10℃/min速率升温至 220℃，以40℃/min 速率升温至 280℃， 保持 17min； c) 进样口温度： 280℃； d) 传输线温度： 200℃； e) 离子源温度： 200℃； f) 载气：高纯氦气； g) 柱流量： 1mL/min； h) 溶剂延迟： 3min； i) 进样方式：分流进样，分流比 ：10:1； j) 质量扫描范围： 40amu～500amu； k) 扫描方式：全扫描 (SCAN)，每种农药的保留时间 、特征离子 参见附录 B中表B.1。 7.2.2 气相色谱 -串联质谱仪条件 以下为 GC-MS/MS参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整： a) 色谱柱： DB-5MS石英玻璃毛细柱（ 30m× 0.25mm× 0.25µ m) 或其他等效柱； 注： DB-5MS柱是 Agilent 公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示 对该产品的 认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱温程： 60℃保持 2min，以10℃/min 速率升温至 320℃，保持 5min； c) 进样口温度： 260℃； d) 传输线温度： 280℃； e) 离子源温度： 230℃； f) 载气：高纯氦气； g) 碰撞气：氩气； h) 柱流量： 1.56mL/min； i) 溶剂延迟： 2min； j) 进样方式： 不分流进样 ； k) 扫描方式：多反应离子检测，每种农药分别选择两对离子，每种农药的保留时间，特征离子对 和碰撞电压 参见附录 B中表B.2。 7.3 进样 分别取空白溶剂、 添加样品提取液、空白样品提取液、 检材样品提取液、 50ng/mL串联质谱质控标 准溶液或 5.0 µ g/mL单级质谱质控标准溶液 ，按 7.2规定的条件进样分析 。进样顺序和进样次