ICS 13.310 A 92 中 华人民 共和国 公共安 全行业 标准 GA GA/T × × × × －× × × × 代替GA/T 208－1999 法庭科学 生物检材中磷化氢检验 顶空气相色谱 和顶空气相色谱 -质谱法 Forensic sciences —Examination methods for pho sphide in biological samples—HSGC and HS GC-MS ×××× -×× -××发布 ×××× -×× -××实施 中华人民共和国公安部 发布 GA/T × × × × —× × × × 1 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 -2009给出的规则起草。 本标准代替 GA/T 208 -1999《中毒案件检材中磷化物的定性及定量分析方法》 ，与GA/T 208 -1999 相比，除编辑性修改外主要技术变化如下： —修改了标准名称（见封面， 1999年版的封面）； —修改了范围的有关内容（ 见第 1章， 1999年版的第1章）； —修改了规范性引用文件的有关内容（见 第2章， 1999年版的第 2章）； —修改了第一篇顶空气相色谱法检测磷化氢及其代谢物的 原理（见第4章，1999年版的第4章）； —修改了第一篇顶空气相色谱法检测磷化氢及其代谢物的试剂和材料 （见第5章， 1999年版的第 5章）； —修改了第一篇顶空气相色谱法检测磷化氢及其代谢物的仪器和设备（见第 6章， 1999年版的第 6章）； —修改了第一篇顶空气相色谱法检测磷化氢及其代谢物的操作方法（见第 7章， 1999年版的第 7 章）； —删除了第二篇 AgDDC法测定磷化氢的有关内容（见 1999年版的第8章~第11章）； —删除了第三篇溴化汞试纸法测磷化氢的有关内容（见 1999年版的第12章~第15章）； —修改了附录 A的有关内容（见 附录 A，1999年版的附录 A）； —修改了附录 B的有关内容（见附录 A，1999年版的附录 B）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分 析分技术委员会 （ SAC/TC 179/SC 1 ） 提出并归口。 本标准起草单位： 公安部物证鉴定中心 ， 中国刑事警察学院， 陕西省公安厅， 司法鉴定科学研究 院。 本标准主要起草人： 侯小平、 常靖、董颖、杜鸿雁、崔冠峰 、朱昱、张爱东、刘伟 。 GA/T × × × × —× × × × 2 法庭科学 生物检材中 磷化氢检验 顶空气相色谱 和顶空气相色谱 -质谱方法 1 范围 本标准规定了 生物检材（血、尿、肝、肾、胃及胃内容等） 中磷化氢的顶空气相色谱（ HSGC）定 量检验、顶空气相色谱 -质谱（ HSGC-MS）定性定量 检验方法。 本标准适用于生物 检材中磷化氢的 定性分析和定量分析。 其他可疑样 品中磷化氢的定性分析和定 量分析可参照使用。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 以空白样品和添加样品作对照，以平行操作的要求，采用 顶空气相色谱 质谱法定性定量，顶空气相 色谱法定量， 以保留时间 、质谱特征离子碎片峰和 相对丰度比作为定性判断依据； 以峰面积为依据，用 外标法进行定量分析。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682 中规定的三级水。在分析中使用的试剂均为分析纯，试剂包括 ： a) 20%硫酸溶液：取 20mL硫酸，缓慢溶于 80mL水中； b) 锌粉（无砷） ； c) 标准溶液： 1) 次亚磷酸钠 溶液（相当于含磷化氢 1.0mg/mL）：精确称取 次亚磷酸钠 (NaH 2PO 2·H2O) 标 准物质 155.90mg ，用少量水溶解后， 稀释至50mL，配制成相当于含磷化氢 1.0mg/mL 的 次亚磷酸钠 标准溶液，置于冰箱中冷藏保存 。有效期 1个月。 2) 次亚磷酸钠工作 液（相当于含磷化氢 0.1mg/mL）：移取次亚磷酸钠溶液（相当于含磷化 氢1.0mg/mL ），用水稀释至 10mL，密封，置于冰箱中 冷藏保存。有效期 7天。实验中所 用其他浓度的标准工作液均由 相当于含磷化氢 0.1mg/mL的次亚磷酸钠工作液 用水稀释得 到。 5.2 材料 GA/T × × × × —× × × × 3 材料包括： a) 10mL顶空瓶； b) 聚四氟乙烯胶垫 ； c) 顶空瓶金属盖； d) 封盖钳； e) 气密性进样针。 6 仪器和设备 仪器和设备包括： a) 气相色谱仪 ：配有火焰光度 -磷型检测器（ FPD-P）或氮磷检测器 (NPD)； b) 气相色谱 -质谱仪：配有电子轰击源（ EI）； c) 顶空自动进样器 ； d) 电子天平； e) 恒温电加热器。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品提取 7.1.1.1 样品制备 在顶空瓶 中加入锌粉 40mg，使锌粉均匀分布在顶空瓶底部，加入 血液等液体检材样品 1.0mL～ 2.0mL或铰碎的肝脏等固体 检材样品 1.0g～2.0g，依次加水 2.0mL，20%硫酸溶液 0.5mL，立即封盖， 混匀。若采用顶空自动进样器，封盖后直接供仪器分析；若手动进样 ，则封盖后室温下静置 20min后， 将顶空瓶置 于恒温电加热器中 35℃～ 40℃下加热 10min，抽取液上气体 100L～500L，供仪器分析 。 7.1.1.2 质控样品 制备 取等量相似基质的空白 样品（若无相似基质空白样品可用血液替代） 两份于顶空瓶中 ，一份作为空 白样品，一份添加相当于含磷化氢 1.0g的次亚磷酸钠 溶液，作为添加样品 ，与检材样品平行操作 ，供 仪器分析。同时取水 1.0mL～2.0mL，添加相当于含磷化氢 2.0µg的次亚磷酸钠标准 溶液，与检材样品 平行操作 ，作为标准工作液， 供仪器分析 。 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 仪器条件 7.1.2.1.1 顶空自动进样器 条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整 ： a) 加热箱温度： 45℃； b) 定量环温度： 95℃； c) 传输线温度： 105℃； d) 气相循环时间： 20min； e) 检材瓶加热平衡时间 ：10min； f) 检材瓶加压时间： 0.2min； g) 定量环充满时间： 0.2min； GA/T × × × × —× × × × 4 h) 定量环平衡时间： 0.2min； i) 进样时间 ：1.0min。 7.1.2.1.2 气相色谱质谱 条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同 样品等实际情况进行调整： a) 色谱柱： HP-PLOT -Q（30m×0.32mm×0.25μm ）或等效色谱柱； 注： HP-PLOT -Q柱是 Agilent公司产品的 商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该 品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱温程： 50℃保持 5min，以 50℃/min速率升温至 200℃，保持 2min； c) 进样口温度： 200℃； d) 传输线温度： 200℃； e) 载气：氦气； f) 进样方式： 不分流进样 或分流进样 ，分流比 5:1； g) 电子轰击能量： 70eV； h) 离子源温度： 200℃； i) 倍增器电压：自动调谐值； j) 柱流量： 1.0mL/min ； k) 质量扫描范围： 19amu~ 80amu ； l) 扫描方式：全扫描（ Scan）。 7.1.2.2 进样 分别吸取检材、空白和添加样品液上气体和标准 溶液液上气体 ，按7.1.2.1的分析条件进样分析 。 7.2 定量分析 7.2.1 样品制备 准确移取血液等液体 检材样品1.0mL～2.0mL，或称取铰碎的肝脏等 固体检材样品1.0g～2.0g两份， 按7.1.1进行操作。 另取等量相似基质的空白样品三 份，其中两份 添加次亚磷酸钠 溶液（添加样品中 产生磷化氢的 含量 应为检材样品中 产生磷化氢 含量的（ 100±50）%），另一份作为空白样品，与检材样品平行操作，得到 空白样品和添加样品供仪器 分析。 7.2.2 仪器检测 7.2.2.1 仪器条件 7.2.2.1.1 顶空自动进样器 条件 按7.1.2.1.1规定的条件分析 。 7.2.2.1.2 气相色谱条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同 样品等实际情况进行调整： a) 色谱柱： HP-PLOT -Q（30m×0.32mm×0.25μm ）或等效色谱柱； 注： HP-PLOT -Q柱是 Agilent公司产品的商品