ICS 65.020.01 CCS B 30 DB36 江 西 省 地 方 标 准 DB36/T 1699—2022 辣椒抗灰霉病苗期人工接种鉴定技术规程 Technical regulations for identification of artificial inoculation of pepper against gray mold at seedling stage 2022 - 11 - 17发布 2023 - 05 - 01实施 江西省市场监督管理局 发 布 DB36/T 1699 —2022 I 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 育苗 .............................................................................. 1 5 人工接种 .......................................................................... 2 6 抗性鉴定 .......................................................................... 2 附录 A（资料性）辣椒灰霉病症状 ........................................................ 4 DB36/T 1699 —2022 II 前 言 本文件按照GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由江西省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：江西省农业科学院植物保护研究所、高安市农业农村局、永丰县农业农村局、彭 泽县农业农村局、万安县农业农村局、玉山县农业农村局、湖口县农业农村局。 本文件主要起草人：胡建坤、黄蓉、黄瑞荣、华菊玲、黄国东、张文志、张会国、曾招圣、曾钦华、 贾志新、肖慧、姜仙美、倪永辉。 DB36/T 1699 —2022 1 辣椒抗灰霉病苗期人工接种鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了辣椒抗灰霉病苗期人工接种鉴定的术语和定义、 育苗、 人工接种及抗病性鉴定与评价。 本文件适用于辣椒品种对灰霉病抗性的鉴定和评价。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 2118 蔬菜育苗基质 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 辣椒灰霉病 Gray mold of pepper 病原菌是灰葡萄孢（ Botrytis cinerea ）的一种辣椒真菌性病害。主要发病症状详见附录A。 3.2 人工接种 Artificial inoculation 采用人工方法将病原物接种到寄主植物的种子或植株上，使其发病。 3.3 对照品种 Control variety 在植物病害抗性鉴定试验中，选择抗性水平较稳定的感病品种作为对照品种。 4 育苗 4.1 育苗基质 以质优泥炭（粒径 0 mm～6mm）为育苗基质。捣碎后加入适量蔬菜复合肥（20gN、P、K三元复合 肥，N：P：K 15-15-15）与适量的清水混配均匀，调节基质含水率至 60%。育苗基质选用标准参照 NY/T 2118 蔬菜育苗基质。 4.2 播种 DB36/T 1699 —2022 2 将制备好的基质置入底部有孔的塑料育秧盘（规格： 54cm×28cm×5cm ，孔径：6cm×6cm-3cm×3cm ， 32孔）中，基质量以装平秧盘为准。秧盘中每孔穴播辣椒种子 4粒～5粒，每个品种播种 1盘，即32孔穴。 4.3 接种前管理 将育苗盘置于 20℃～25℃温室大棚内土层上，种子发芽出苗后，保持秧盘基质湿润。出苗 7d～10d 定苗，每穴保留健壮辣椒苗 3株，常规管理。苗龄 20d～25d，每盘追施尿素 2g（兑水配成溶液）。辣椒 苗可使用杀虫剂防虫，但不使用杀菌剂防病。待幼苗长至 4叶期进行接种鉴定。 5 人工接种 5.1 接种温度 以春、秋季为宜。露地接种，气温宜在 18℃～25℃进行；温室（棚）接种，气温可调节至 20℃左 右。 5.2 接种体制备 采用灰霉病菌强致病力菌株接种。由保存试管中挑取菌核或菌丝块移至装有PDA培养基的无菌培养 皿中央进行活化（20℃，3 d～5 d），于菌落边缘用打孔器取新鲜菌丝块接入新PDA培养基上，20℃下 黑暗培养14d后用少量无菌水将灰霉菌孢子洗下，在光学显微镜下使用血球计数板对菌悬液中的孢子进 行计数，用无菌水将洗下的孢子液配成106 /mL的孢子悬浮液待用。PDA培养基的制方为：200g土豆、20g 蔗糖和15g琼脂粉，蒸馏水1L。 5.3 接种方法 保存于4℃条件下的辣椒灰霉病菌（ Botrytis cinerea ）菌株接种在平板PDA培养基上活化，取新鲜 菌丝块接入新的平板PDA培养基上，20℃下黑暗培养14 d，收集灰霉菌孢子并配成106 /mL的孢子悬浮液。 用移液枪定量吸取孢子悬浮液，将孢子液滴加在辣椒苗心生长点上，接种菌液量30 µL/株。接种前将培 育辣椒苗的基质用清水浇透，接种后在育苗盘上支起小棚并用塑料膜覆盖棚架密闭，每日于小棚四周浇 水保湿。 5.4 接种后管理 接种病菌后的辣椒苗可置温室（棚）进行管理，温度20℃左右；平均温度在18-25℃时也可在露地 进行管理。辣椒苗接菌后保湿24h，之后喷清水保持盘中基质湿润。露地管理雨天需做避雨处理，晴天 气温偏高需做遮阳处理。保湿与避雨处理均可用竹条与塑料薄膜制成拱棚覆盖辣椒苗。 6 抗性鉴定 6.1 鉴定方法 记录接种日期、病害症状始现期。接种后 20 d～25 d，调查参鉴材料的病株数，计算病株率，感病 对照品种病株率达 50%以上时进行最终病情调查。病株率计算方法参照公式（1）。 病株率（%）=发病株数/调查总株数×100............... ................... (1) 人工接种鉴定结果依据抗病性分级标准划分辣椒品种的抗感水平。 6.2 抗性评价 DB36/T 1699 —2022 3 根据调查统计的各品种苗期病株率，按照表 1评定各参鉴品种对灰霉病的抗性。 表1 辣椒品种苗期抗灰霉病评价标准 抗性类型 病株率（ %） 高抗（HR） ≤1.0 抗（R） 1.1 ～10.0 中抗（MR） 10.1 ～30.0 中感（MS） 30.1 ～50.0 感病（S） 50.1 ～70.0 高感（HS） ＞70.0